Técnicas de cultivo in vitro para la propagación vegetativa de Lilium

Pablo Alejandro Marinangeli.

1997.

131 h. : ilustraciones ; 30 cm.

"Tesis Magister en Ciencias Agrarias".

Director de tesis: Néstor Raúl Curvetto.

Tesis (magister)--Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía, 1998.

Resumen: La micropropagación de Lilium presenta algunos problemas que dificultan la difusión de la técnica. Entre ellos, el logro de una alta tasa de multiplicación y el establecimiento a campo de los microbulbos, demandan una solución prioritaria. El objetivo general de la presente tesis fue actualizar y mejorar las técnicas de micropropagación de Lilium y cuantificar su potencialidad y factibilidad en relación a los métodos tradicionales de multiplicación in vivo. El Primer Capítulo trata sobre la descripción del lilium y los sistemas de propagación, destaca su importancia como cultivo ornamental y plantea los problemas de la micropropagación del género. En el Segundo Capítulo se describe el proceso de diferenciación de bulbilos desde escamas de bulbo de Lilium longiflorum Thunb. por medio de un seguimiento morfológico. Se incluye un estudio de la cinética del proceso bajo las condiciones experimentales y se analizan posibles factores intrínsecos que afectan el número de bulbilos diferenciados y su biomasa. Se determinaron eventos reconocibles en el proceso de diferenciación de bulbilos de manera de poder estudiarlo dividido en fases que proporcionan una jerga para la interpretación de resultados de otras experiencias. También se pudo identificar a las escamas intermedias del bulbo como el material de trabajo adecuado por su homogeneidad morfológica y fisiológica. Para incrementar la tasa de multiplicación, en el Tercer Capítulo, se plantean estrategias basadas en la acción de mensajeros celulares de señales hormonales y ambientales. Las sustancias que probaron tener efectos estimulantes sobre el proceso de diferenciación de bulbilos in vitro, usadas como pretratamientos o suplementadas al medio de cultivo, son: el AMP cíclico, la adenosina y la forscolina, todos ellos probados efectores del sistema adenilatociclasa, y el ácido traumático, un promotor del mecanismo celular de respuesta a lesiones. Sin duda estas estrategias para mejorar la propagación de Lilium no son las únicas y existen múltiples aproximaciones al problema; sin embargo las combinaciones exitosas tendrían una sencilla y económica aplicación a nivel comercial y podrían ser complementarias de otras prácticas. Establecidas las condiciones que promueven el proceso de bulbificación in vitro, en el Cuarto Capítulo, se realizan comparaciones entre: i) micropropagación de distintos genotipos difundidos en el mercado: Lilium longiflorum, L. Iancifolium Thunb., híbridos Asiáticos e híbridos Orientales. ii) micropropagación vs. propagación in vivo para todos los genotipos. iii) micropropagación y propagación in vivo tradicionales vs. micropropagación y propagación in vivo con un pretratamiento con ácido traumático 1 µM, el compuesto que probó ser el más efectivo en estimular el proceso de diferenciación. Se incluyen los resultados de un ensayo que demuestra que la calidad deficiente del bulbo madre afecta adversamente la tasa de propagación in vitro e in vivo. Una información relevante, no disponible hasta el momento, es la referente al crecimiento en suelo de bulbilos de distintos orígenes (basales, axilares, producidos in vivo e in vitro) y distintos genotipos. En el Quinto Capítulo se presenta un estudio comparativo de la respuesta en suelo del material mencionado, incluyendo microbulbos. Así, fue posible determinar la gran variabilidad en el crecimiento entre bulbilos de distintos orígenes e incluso entre los del mismo origen pero de distintos genotipos. Se detectó que los microbulbos tienen un crecimiento reducido en valores absolutos y que las pérdidas van del 20 al 36 por ciento. Finalmente, en el Sexto Capítulo, se presenta el estudio del efecto del subcultivo de los microbulbos en condiciones culturales especiales con el objetivo de incrementar su biomasa. Como la finalidad última es mejorar la performance ex vitro de los microbulbos, se realizaron comparaciones de crecimiento en tierra entre microbulbos subcultivados in vitro y no subcultivados. Se demuestra que el subcultivo de los microbulbos en un medio con altas concentraciones de sacarosa y sales minerales permite su crecimiento hasta alcanzar una biomasa superior a la de los bulbilos producidos in vivo. Los microbulbos subcultivados tienen una tasa de supervivencia y una proporción de plántulas con tallo aéreo sensiblemente superior. Los resultados emergentes de las experiencias detalladas en esta Tesis representan una valiosa información que es transferible y de aplicación práctica tanto en laboratorios de micropropagación como en empresas de producción de bulbos. La combinación de un pretratamiento de los explantos con ácido traumático en la fase de multiplicación y del subcultivo in vitro de los microbulbos durante tres meses en un medio de cultivo enriquecido en sacarosa y sales minerales, constituye la mejor propuesta para lograr abundante material apto para iniciación a campo. CALIFICACION DEPARTAMENTO DE GRADUADOS Calificación de la defensa oral: Sobresaliente - 10 (diez) Fecha: 9/12/97

Incluye referencias bibliográficas.